潔凈室浮游菌檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

⒈ 目的：建立浮游菌檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)操作程序，用以規(guī)范員工的檢測(cè)操作。

⒉ 范圍：適用于公司內(nèi)部生產(chǎn)潔凈區(qū)內(nèi)的浮游菌檢測(cè)工作

⒊ 責(zé)任：生產(chǎn)部、生產(chǎn)車間、質(zhì)量管理部、QC檢驗(yàn)室主任、檢驗(yàn)員對(duì)本規(guī)程的執(zhí)行負(fù)責(zé)。

⒋ 檢測(cè)依據(jù)：GB/T16293—1996（醫(yī)藥工業(yè)潔凈室浮游菌的測(cè)試方法）。

⒌ 內(nèi)容：

5.1?器具與材料

5.1.1?浮游菌采樣器

5.1.2?真空抽氣泵

5.1.3?培養(yǎng)皿

5.1.4?普通肉湯培養(yǎng)基

5.1.5?恒溫培養(yǎng)箱

5.2?測(cè)試步驟

5.2.1?測(cè)試前，儀器、培養(yǎng)皿表面必須嚴(yán)格消毒。

5.2.1.1?采樣品在進(jìn)入被測(cè)前先用消毒房間的消毒劑滅菌，用于100級(jí)潔凈室的采樣器宜一直放在被 測(cè)房間內(nèi)。

5.2.1.2?用消毒劑擦凈培養(yǎng)皿的外表面。

5.2.1.3?采樣前，先用消毒劑消毒采樣器的頂蓋、轉(zhuǎn)盤以及罩子的內(nèi)外面，采樣結(jié)束，于用消毒劑輕輕噴射罩子的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤。

5.2.1.4?采樣口及采樣管，使用前必須高溫滅菌。如用消毒劑對(duì)采樣管的及外壁及內(nèi)壁進(jìn)行消毒時(shí)，應(yīng)將管中的殘留液倒掉并晾干。

5.2.1.5?采樣者應(yīng)穿戴與被測(cè)潔凈區(qū)域相應(yīng)的工作服，在轉(zhuǎn)盤上放入或調(diào)換培養(yǎng)皿前，雙手用消毒劑消毒。

5.2.2?采樣程序

5.2.2.1?儀器經(jīng)消毒后先不放入培養(yǎng)皿，開動(dòng)真空泵抽氣，使儀器中的殘余消毒劑蒸發(fā)，時(shí)間不少于5分鐘，并調(diào)好流量、轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速。

5.2.2.2?關(guān)閉真空泵，放入培養(yǎng)皿，蓋上蓋子后調(diào)節(jié)采樣器縫隙高度。

5.2.2.3?置采樣口于采樣點(diǎn)后，依次開啟采樣器、真空泵、轉(zhuǎn)動(dòng)定時(shí)器，根據(jù)采樣量設(shè)定采樣時(shí)間。

5.2.3?培養(yǎng)

全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

在30～35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于48小時(shí)。

每批培養(yǎng)基應(yīng)有對(duì)照試驗(yàn)，檢驗(yàn)培養(yǎng)基本身是否污染?？擅颗x定3只培養(yǎng)皿作對(duì)照培養(yǎng)。

5.2.4?菌落計(jì)數(shù)

5.2.4.1?用肉眼直接計(jì)數(shù)、標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì)，然后用5～10倍放大鏡檢查，看是否有遺漏。

5.2.4.2?若平板上有2個(gè)或2個(gè)以上的菌落重疊，可分辨時(shí)仍以2個(gè)或2個(gè)以上菌落計(jì)數(shù)。

5.3?注意事項(xiàng)

5.3.1?采樣器的采樣口必須用便于消毒及化學(xué)性能穩(wěn)定的材料制造。

5.3.2?采樣管嚴(yán)禁滲漏，內(nèi)壁應(yīng)光滑。

5.3.3?采樣管的長(zhǎng)度應(yīng)根據(jù)測(cè)點(diǎn)的高度定，盡量減少?gòu)澢?/p>

5.3.4?使用前應(yīng)仔細(xì)檢查每個(gè)培養(yǎng)皿的質(zhì)量，培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿有變質(zhì)、破損或污染的不能使用。

5.3.5?操作時(shí)應(yīng)防止采樣管的污染和其他人為對(duì)樣本的污染。

5.3.6?對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細(xì)的記錄。

5.3.7?由于細(xì)菌各類繁多，差別甚大，計(jì)數(shù)時(shí)一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或下面仔細(xì)觀察，不要漏計(jì)培養(yǎng)皿邊緣生長(zhǎng)的菌落，并須注意細(xì)菌菌落或培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必要時(shí)用顯微鏡鑒別。

5.4?測(cè)試規(guī)則

5.4.1?測(cè)試狀態(tài)

5.4.1.1 ?浮游菌測(cè)試前，被測(cè)試潔凈室 （區(qū)）溫、濕度須達(dá)到規(guī)定的要求，靜壓差、換氣次數(shù)、空氣流速必須控制在規(guī)定值內(nèi)。

5.4.1.2?浮游菌測(cè)試前，被 測(cè)試潔凈室（區(qū)）已經(jīng)過消毒。

5.4.1.3?測(cè)試狀態(tài)有靜態(tài)和動(dòng)態(tài) 兩種，測(cè)試狀態(tài)的選擇必須符合生產(chǎn)的要求，并在報(bào)告中注明測(cè)試狀態(tài)。

5.4.2?測(cè)試人員

5.4.2.1?測(cè)試人員必須穿戴符合環(huán)境級(jí)別的工作服。

5.4.2.2?靜態(tài)測(cè)試時(shí)，室內(nèi)測(cè)試人員不得多于2人。

5.4.3?測(cè)試時(shí)間

5.4.3.1?對(duì)單向流，如100級(jí)凈化房間及層流工作臺(tái)，測(cè)試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于10分鐘后開始。

5.4.3.2?對(duì)非單向流，如10000級(jí)，及其以上的凈化房間，測(cè)試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于30分鐘后開始。

5.4.4?浮游菌濃度計(jì)算

5.4.4.1?采樣點(diǎn)數(shù)量及其布置

5.4.4.1.1?最少采樣點(diǎn)數(shù)目：浮游菌測(cè)試的最少采樣點(diǎn)數(shù)目分為日常監(jiān)測(cè)及環(huán)境驗(yàn)證兩種情況，具體情況見下表。

最少采樣點(diǎn)數(shù)目

5.4.4.1.2??采樣點(diǎn)的位置

5.4.4.1.2.1?對(duì)每個(gè)100級(jí)潔凈操作區(qū)域（如層流罩、層流工作臺(tái)），可在離藥物敞開口處30cm處設(shè)測(cè)點(diǎn)。

5.4.4.1.2.2?對(duì)每個(gè)10000級(jí)潔凈工作區(qū)域（如藥物開口工作區(qū)）可在工作面處設(shè)測(cè)點(diǎn)。

5.4.4.1.2.3??送風(fēng)口測(cè)點(diǎn)位置離開送風(fēng)面30cm左右。

5.4.4.1.2.4?可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動(dòng)范圍處增加測(cè)點(diǎn)。

5.4.4.2?最小采樣量

采樣量根據(jù)日常檢測(cè)及環(huán)境驗(yàn)證定，每次最小采樣量見下表。

最小采樣量

5.4.4.3?采樣次數(shù)：每個(gè)采樣點(diǎn)一般采樣一次。

5.4.5?采樣注意事項(xiàng)

5.4.5.1?對(duì)于單向流功送風(fēng)口，采樣器采樣管口朝向應(yīng)正對(duì)氣流方向；對(duì)于非單向流，采樣管口向上。

5.4.5.2?布置采樣點(diǎn)時(shí)，至少應(yīng)離開塵粒較集中的回風(fēng)口1m以上。

5.4.5.3?采樣時(shí)，測(cè)試人員應(yīng)站在采樣口的下風(fēng)側(cè)。

5.5??記錄：對(duì)測(cè)試情況進(jìn)行記錄（房間溫度、相對(duì)濕度、壓差及測(cè)試狀態(tài)等）。

5.6??結(jié)果計(jì)算

用計(jì)數(shù)方法得出各個(gè)培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。

每個(gè)測(cè)點(diǎn)的浮游菌平均濃度的計(jì)算見下式。

菌落數(shù)

平均濃度（個(gè)ㄍm3）=?—————

采樣量